各种检查方法,保你发现螨虫

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发现螨虫的各种检查方法

ArianeNeuber

DrMedVetCertVDDECVDMRCVS

Director,Derm4Pets

HeadofDermatology,ChilternReferralServices

ChalfontStGiles,UK

TimNuttall

BScBVScCertVDPhDCBiolMRSBMRCVS

HeadofDermatology

Royal(Dick)SchoolofVeterinaryStudies

UniversityofEdinburgh

Edinburgh,UK

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各种检查方法的特异性和敏感性

本文提到的这些检查技术的特异性都很高。每种证据几乎有接近%特异性针对相关感染；唯一例外是可能是共生体的蠕形螨。像比如虱子、耳螨和姬螯螨这样的其他寄生虫，可能性很低但仍然存在是偶然发现的可能性。然而，这些检查技术的敏感性差异很大。一般来说，透明胶带和印压涂片敏感性最低，拔毛检查敏感性中等，皮肤刮片敏感性最高。当然这很大程度取决于兽医师的技术和经验，以及采样部位的选择。敏感性也与样本量直接相关，尤其与取样的部位有关。

姬螯螨和耳螨的检查

通常可以直接发现这些寄生虫，但可能会因临床症状不同而有所变化。在80-%的典型的轻中度瘙痒、大量皮屑和耳分泌物病例中，能发现成虫和未成熟螨虫、虫卵和粪便颗粒。然而，对于更严重瘙痒、特异性症状较少的病例，敏感性可降至50%或更低。这可能与自体损伤增多和/或螨虫特异性的过敏反应而减少螨虫数量有关。

蠕形螨的检查

通常可以直接发现蠕形螨，只要刮片刮到真皮层（即轻微出血）。慢性炎症、皮肤增厚可能难以刮片，拔毛、从疖处挤压采集病料甚至是钻取活检都更有价值。像沙皮犬这种典型的富含粘液的增厚皮肤特别很难采取刮片操作。某些特殊部位也很难刮片，爪部的真皮层很深，所以很难刮到真皮层。一些病例中，瘢痕会让刮片更难操作。

临床上，蠕形螨病动物能找到处于生命周期各个阶段的大量螨虫。然而，由于蠕形螨是共生寄生虫，在其他病例中偶尔会发现一两只成虫。所以兽医师的临床判断很重要（例如是否应该怀疑蠕形螨病，可能性有多大，病史和临床症状是否一致），如果需要治疗，应重复做皮肤刮片并仔细评估临床效果。死的蠕形螨很快分解，在皮肤刮片和细胞学上表现为半透明的残骸。定期使用莫昔克丁治疗的动物身上发现蠕形螨有时非常困难。

重复刮片有助于评估治疗效果。死亡螨虫和活着成虫应该越来越多，存活螨虫和未成熟螨虫应越来越少，否则应该重新评估治疗方案并寻找潜在病因，尤其是成年发病的蠕形螨病和有继发性脓皮症的病例。

根据IvanRavera的研究成果，目前已有一种蠕形螨特异性的聚合酶链式反应（PCR）检测。然而，他得出的结论是所有健康犬身上都能发现蠕形螨。这种PCR检测针对拔毛和刮片而获得的采样快速且高度敏感，但在诊断蠕形螨病方面的有效性尚未得到验证。可能有很高的假阳性率，目前不推荐使用。

诊断疥螨

疥螨不是共生寄生虫，因此任何成虫、虫卵或粪便颗粒都具有诊断意义。然而，疥螨很难发现。采样应该选择在好发部位（耳廓、肘部、跗部和胸腹侧）的皮肤无脱皮开裂的原发病灶（结痂的红斑丘疹）。多次刮片并考虑用前面的方法浓缩收集到的病料。

酶联免疫吸附试验（ELISA）检测血清特异性疥螨IgG是一种很好的方法。最初有研究发现该检测敏感性和特异性分别是92%和96%，最近的研究其结果稍低。感染姬螯螨、蠕形螨、虱子、耳螨和跳蚤的犬血清通常呈阴性结果。感染后的第一个月，在产生足够的IgG滴度前血清学结果可能是假阴性。先前感染过的犬可能出现假阳性反应；滴度通常在数周内恢复正常，但这个过程最长可能达到6个月。假阳性反应也可见于一些对尘螨有强烈反应的特应性犬只，因为这些尘螨与疥螨共享交叉反应抗原。这可能是有意义的，因为疥螨在犬特应性皮炎中是一个重要的鉴别诊断。

与寻找疥螨、虫卵或螨虫粪便和/或尝试性治疗之后的临床手段相比，耳廓-爪垫反射（刺激身体同侧后肢运动来抓挠耳廓）具有良好的敏感性和特异性。然而有些皮肤科医生认为这种反射只能表明耳部瘙痒，并不能视为疥螨感染的特异性发现。

如果无法发现螨虫，但是病史和临床症状提示螨虫感染，和/或耳廓-爪垫反射阳性、血清学阳性时，应该采取尝试性治疗。大多数病例中，双甲脒、司拉克丁、莫昔克丁、多拉菌素、伊维菌素、sarolaner萨欧兰那、fluralaner氟雷拉纳和afoxolaner阿福拉纳应该是有效的，不过其中一些药目前未获得批准用于治疗该病。不管怎样，有治疗失败的孤立报告强调在确认或排除疥螨感染前查找所有有效证据的重要性。

跳蚤和跳蚤过敏性皮炎

据报道，在患有跳蚤过敏性皮炎（FAD）的动物中，不到50%的病例有发现跳蚤的迹象，这可能是因为免疫反应和舔毛行为增加的共同作用。感染更严重病例更容易发现跳蚤，但没有跳蚤过敏性皮炎的病例时致病性可能较低，并且是主要皮肤病（例如犬特应性皮炎中的继发性跳蚤感染）的附带发现。严格来说，如果没有跳蚤特异性血清学阳性结果和/或符合1型和/或4型超敏反应的皮内试验，不能确诊跳蚤过敏性皮炎。

跳蚤提取物的皮内试验阳性率据报道从2%-77%不等。这可能反映了特应性皮炎（AD）、跳蚤过敏性皮炎（FAD）和AD/FAD并发病例在不同地区的比例，以及所用不同试剂的比例。虽然跳蚤的主要过敏原是唾液蛋白，但许多跳蚤特异性检测使用的未加工的整体提取物。一种18kD的主要过敏原已经可以成功克隆、测序并命名为Ctef1。自然发病或实验导致的感染跳蚤的动物大约有80%对Ctef1有反应，但低敏感度使得纯化Ctef1不适用于临床诊断。在已证实为FAD病例的研究中，与纯化的跳蚤唾液抗原相比，整体提取物在皮内试验中敏感性表现更低。在包括犬AD和FAD病例的另一项研究中，基于ELISAs的FcεRIα（高亲和力IgE受体）通过利用纯化的跳蚤唾液抗原，表现出比整体提取物皮内试验更高的敏感度。针对确诊为犬FAD病例中，整体提取物和纯化跳蚤唾液抗原在皮内试验中的敏感性、特异性、阳性预测值和阴性预测值均优于利用纯化跳蚤抗原的基于ELISA的FcεRIα检测。皮内试验和血清IgE浓度与犬临床FAD病例存在相关性，尽管其他研究表明抗跳蚤IgE和IgG存在于健康和患病犬中，而且浓度与病情程度并不相关。据报道有24%-67%的健康动物表现整体提取物的阳性皮内试验结果。这似乎并没有能在未来预测FAD病例的进展。可控的活体跳蚤检测FAD病例具有高度特异性和敏感性，但只在某些特定专科诊所才能做到。

粪便检查

粪检并不是皮肤病病例的常见检查。粪检对检测体内寄生虫很有用，尽管在马、小型哺乳动物和异宠中，体内寄生虫会更经常与瘙痒和其他问题有关联。粪检对并发腹泻的病例很有帮助。跳蚤、虱子、蠕形螨和姬螯螨等寄生虫可能存在于过度舔毛的动物粪便中（此时透明胶带和皮肤刮片敏感度较低），钩虫性爪部皮炎的动物可发现钩虫，如果摄入污染的食物，还可能发现饲料螨虫。粪检特别适用在猫自我诱发性脱毛病例中寻找蠕形螨和跳蚤。粪便中发现花粉颗粒说明动物可能曾暴露于花粉环境中。

粪检技术

1）取2-5g新鲜粪便于常用容器或其他合适容器中。

2）加入30-60mL饱和盐水（NaCl）（也可用饱和硫酸锌或糖溶液）。

3）加入少量0.5mm的玻璃珠，用力搅拌以混合或搅碎样本。

4）弃去成块的粪便和碎屑。

5）将滤液倒入平顶管，直至凸液面突出管口。

6）在凸液面上盖上盖玻片，静置15分钟。

7）取下带有液体的盖玻片，液面朝下放在载玻片上镜检。

8）4倍镜检查寄生虫（图1）、寄生虫卵和花粉颗粒，10倍物镜检查可疑位置观察更多细节。

图1、猫粪便样本粪便浮选法中观察到的寄生虫。a戈托伊蠕形螨，b姬螯螨。

环境寄生虫

环境寄生虫是一种特殊情况，因为它们在动物身上的存在时间很短并且容易错过，应该从动物的周围、睡窝和食物中去寻找。这包括蚊子、库蠓、黑蝇、沙蝇、虻，其他还有马蝇、螫蝇、黑角蝇、齿股蝇、虱蝇，还有螫蝇，鸡皮刺螨，红家禽螨，饲料螨。正常情况下一般感染动物身上可发现齿股蝇，其他寄生虫常见于动物生活的环境中。一些专门设计捕捉昆虫或螨虫的装置很有用，尽管区别寄生虫与环境中无害的节肢动物可能需要专家鉴定。恙螨成虫是自由生活的环境螨虫，但幼虫通常可以在寄生宿主上发现。

真空吸尘法

用吸尘器寻找寄生虫虽然并不常见，但是已被证实在采样跳蚤、虱子、姬螯螨、耳螨、痒螨、疥螨、蠕形螨以及尘螨和饲料螨方面是有效的手段。一份报告指出，这种方法比皮肤刮片更易检出表皮的螨虫。皮肤碎屑通过手持或传统真空吸尘器上的过滤网收集得到。收集的碎屑与氢氧化钾或浮选液混合镜检。不过一些动物会因真空吸尘器的噪音而感到不安。

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